甘薯中6花青素(矢車菊素、芍藥素、天竺葵素、錦葵素、矮牽牛素、飛燕草素)含量的測定簡介
測定原理
甘薯中花青素主要以花色苷的形式存在。試樣經(jīng)甲醇-水的鹽酸溶液超聲提取花色苷后,經(jīng)沸水浴發(fā)生氯化,水解成帶氯離子的花青素,用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定,以特征離子對和保留時間定性,外標(biāo)法定量。
試劑
甲酸(CH2O2,CAS號:64-18-6):色譜純。
甲醇(CH3OH,CAS號:67-56-1):質(zhì)譜級。
乙腈(C2H3N,CAS號:75-05-8):質(zhì)譜級。
鹽酸(HCl,CAS號:7647-01-0):優(yōu)級純。
標(biāo)準(zhǔn)品
氯化天竺葵素(PelargonidinChloride):CAS號134-04-3,純度≥96%。
氯化矢車菊素標(biāo)準(zhǔn)品
氯化矢車菊素(CyanidinChloride):CAS號528-58-5,純度≥96%。
氯化芍藥素(PeonidinChloride):CAS號134-01-0,純度≥96%。
氯化錦葵素(MalvidinChloride):CAS號643-84-5,純度≥96%。
矮牽牛色素標(biāo)準(zhǔn)品
氯化矮牽牛素(PetunidinChloride):CAS號1429-30-7,純度≥96%。
氯化飛燕草素(DelphinidinChloride):CAS號528-53-0,純度≥96%。
單標(biāo)貯備液
1mg/mL的單標(biāo)儲備液:甲醇中氯化天竺葵素、甲醇中氯化矢車菊素、甲醇中氯化芍藥素、甲醇中氯化錦葵素、甲醇中氯化矮牽牛素、甲醇中氯化飛燕草素
步驟
試樣制備
甘薯薯塊或葉片樣品用凍干機凍干后用粉碎機進行粉碎,過250μm篩后在-20°C環(huán)境條件下保存,備用。
提取
準(zhǔn)確稱取100mg甘薯凍干粉末放入2mL離心管,加入提取液(5.2.1)1.5mL,振蕩均勻,常溫超聲提取10min,8000r/min常溫離心3min,保留沉淀,吸取上清液轉(zhuǎn)移至10mL離心管,反復(fù)提取4次,總收集液定容至6mL。
水解
將收集的上清液于沸水浴中水解1h,取出后自來水沖淋收集上清液的離心管,使溶液冷卻至室溫,用0.22μm有機相濾膜過濾待測。樣品制備后,在4°C避光環(huán)境條件下,保存時間不超過3d。7.4液相色譜、質(zhì)譜條件設(shè)置
素材來源于網(wǎng)絡(luò),如有侵權(quán),請聯(lián)系刪除。